Храм Успіння Божої Матері в Козачій слободі вперше згадується в стародавніх московських літописах в 1642 році, як «Дерев'яна церква Успіння Пресвятої Богородиці та мучеників Флора і Лавра (покровителів ямщиков), що в старій Коломенської Ямській слободі». Після 1651 слобода була переведена на зачепитися, а місце довго не заселялися і в 1657 р він значиться під назвою «Церква дерев'яна Пречистої Богородиці Успіння, що в Козачій слободі за Москвою-рікою». У той час храм ще «стояв без співу», тобто служб в ньому не було.
У 1662 р храм був відновлений вже як Успенський в Козачій слободі і в літописах в 1694 значиться вже як «Церква Успіння Пресвятої Богородиці, що в Козачій слободі на Вспольє». У 1695-1697 рр коштом стольника В.Ф.Полтева в слободі козаків, вихідців з південних околиць Росії, було побудовано існуючу будівлю храму з головним престолом Успіння Пресвятої Богородиці.
Одноглавая церква належить до типу «восьмерик на четверику». Фасади прикрашені звичайним декором того часу - напівколонки, карнизи, лиштви з розірваними франтони. У 1768г Г.Нестеров влаштував боковий вівтар Сімезерской ікони Божої Матері.А в 1797-1798гг на кошти парафіянки, вдови генерал-майора, П.І.Поздняковой, споруджена трапезна з прибудовами Седміезерскім (лівий) і ікони Божої Матері «Утамуй мої печалі» ( правий), а також нова дзвіниця. Обсяг трапезній оформлений з півдня і півночі фронтонами. Дзвіниця завершувалася шпилем. Невелика за величиною, дзвіниця виглядає стрункою завдяки декоративним двоколонним портиком по трьом сторонам нижнього ярусу.
У храмі зберігалося напрестольне Євангеліє 1696г і храмова ікона Успіння Божої Матері 1696г. У 1812г храм вигорів зсередини. Все внутрішнє оздоблення і майно храму згоріло. У 1818г церковний староста Микита Карпишев відновив храм (раніше, ніж свій згорілий будинок). У 1869-1872гг храм був заново оброблений на кошти парафіян і нового старости купця П.Рогаткіна і його сина, які жертвували на церкву великі суми. Протягом трьох століть в храмі змінилося не одне покоління духовенства та храмового кліру.
В уцілілих і дійшли до наших днів архівах збереглися імена лише кількох священиків: о.Іоанна -1653г., О.Козьма - 1670г., О.Евтропій -1675г., О.Іоакім (Кузьмін) - 1681г., О.Василь (Михайлов ) - 1687г., о.Михайло (Константинов) - 1718р., о.Андрій (Федоров) - 1722-1737гг., О.Федоров (Васильєв) - 1771-1786гг., о.Михайло (Нікітін) - 1796-1799гг. , о.Микола (Васильєв) - 1800-1804гг., о.Сергий (Булатов) - 1900-1911гг., о.Андрій (Воскресенський) - 1912-1930гг. На Ювілейному Архієрейському Соборі в серпні 2000р. в числі 129 новопрославлених святих, вбитих за віру на Бутовському полігоні, був і протоієрей Андрій Воскресенський. Тоді ж рішенням Священного Синоду було встановлено щорічне церковне шанування сщмч.Андрея - це день його мученицької кончини - 31 жовтень н.с. Останній настоятель храму Андрій Володимирович Воскресенський за підтримки старости Д.М.Рогаткіна-Ежікова готував публікацію з історії церкви та життя козацтва за матеріалами церковних архівів.
У 1922р. храм був закритий. Влада вилучили понад 11 пудів золотих і срібних церковних прикрас і начиння. Верх дзвіниці і глави храму були зруйновані, зламаний будинок причту. Архів і підготовлені батьком Андрієм до публікації матеріали загинули.
У 1983р., Коли храм був відреставрований, в ньому розміщувалися друкарня і архів Всесоюзного заочного фінансово-економічного інституту. В кінці 1990 г.городскіе влада ухвалила рішення про повернення храму Руської Православної Церкви. У 1994р. були відновлені богослужіння, почали діяти недільні школи для дітей і дорослих, бібліотека.